PCR試劑盒通常有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶聯(lián)系物，加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，避免發(fā)作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。試劑盒的選擇：

　　◎試劑應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡(jiǎn)便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)。

　　◎特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)，使測(cè)定結(jié)果升高，可能導(dǎo)致假陽(yáng)性，所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。

　　◎精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍。

　　◎準(zhǔn)確度：通過(guò)添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

　　PCR試劑盒操作時(shí)注意事項(xiàng)：

　　1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用AChRab試劑盒廠家供應(yīng)/量大從優(yōu)嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.

　　2.若不同批號(hào)ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

　　3.反應(yīng)時(shí)間的誤差，做大量標(biāo)本時(shí)，孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。

　　4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

　　5.加樣時(shí)樣品量誤差，對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大，但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響較大，建議校對(duì)加樣器。